Nazwa programu lub funduszu:
„doktorat wdrożeniowy; edycja”
Nazwa projektu:
„Rozwój małocząsteczkowych immunomodulatorów ludzkiego układu odpornościowego jako nowej terapii przeciwnowotworowej”
Kierownik projektu: 
dr hab. Elżbieta Kołaczkowska, prof. UJ
Wartość dofinansowania:
 PLN
Całkowity koszt inwestycji:
 PLN
Krótki opis projektu
Celem projektu jest rozwój małocząsteczkowych immunomodulatorów ludzkiego układu odpornościowego w postaci inibitorów kinazy HPK1, wykazujących biodostępność po podaniu doustnym o aktywności przeciwnowotworowej.
Białko HPK1 jest kinazą serynowo-treoninową należącą do rodziny MAP4K odpowiedzialną m.in. za fosforylację białek adaptorowych SLP-76 oraz BLNK pełniących kluczową rolę w ścieżkach sygnalizacyjnych odpowiednio TCR w limfocytach T oraz BCR w limfocytach B. Fosforylacja białek adaptorowych SLP-76 czy BLNK indukuje ubikwitynację, co prowadzi do ich degradacji proteasomalnej. Następstwem degradacji SLP-76 i BLNK jest zahamowanie aktywności ścieżek TCR i BCR, co prowadzi do zmniejszonej aktywności limfocytów T i B. Dodatkowo, HPK1 poprzez regulację ekspresji cząsteczek kostymulatorowych może mieć wpływ na prezentację antygenów przez komórki dendrytyczne. W związku z tym inhibicja aktywności kinazowej HPK1 przez małocząsteczkowych antagonistów stwarza możliwość wykorzystania potencjału własnego układu odpornościowego pacjenta do wydajnego rozpoznania i efektywnego atakowania komórek nowotworowych.

Realizacja projektu będzie wymagała znajomości następujących metod:

• cytometria przepływowa, szczególnie w kontekście analiz cytometrycznych limfocytów
• AlphaLISA
• reakcja łańcuchowa polimerazy w czasie rzeczywistym
• western blotting
• metody oparte na transferze energii rezonansu fluorescencji
• ADP-Glo
• CTG-Glo
• kokultury limfocytów z komórkami nowotworowymi / komórkami dendrytycznymi
• testy funkcjonalne z użyciem ludzkich i/lub mysich regulatorowych limfocytów T

Pierwszym etapem prac będzie zaprojektowanie, rozwój i optymalizacja kaskady służącej identyfikacji związków aktywnych o pożądanym profilu farmakologicznym. Związki będą charakteryzowane pod kątem parametrów fizykochemicznych oraz profilowane w testach ADME in vitro. Aktywni antagoniści HPK1 spełniający ustalone kryteria zostaną sprofilowani w badaniach farmakokinetycznych i, po uprzedniej identyfikacji specyficznych biomarkerów odpowiedzi, użyci w badaniach farmakokinetyczno-farmakodynamicznych. Najlepsze związki zostaną przetestowane zarówno w monoterapii, jak i w kombinacji z inhibitorami punktów kontrolnych (przeciwciała aPD-1, aPD-L1 czy aCTLA-4) na mysich modelach syngenicznych w celu potwierdzenia aktywności przeciwnowotworowej in vivo. Równolegle, związki charakteryzowane będą pod kątem cytotoksyczności na wybranych liniach i komórkach pierwotnych oraz selektywności kinomowej, co przyczyni się do rozwoju strategii różnicujących wobec inhibitorów konkurencji.
Związki narzędziowe opracowane w ramach prac B+R zostaną użyte do stworzenia nowych, potencjalnie pierwszych w swojej klasie, inhibitorów aktywności kinazowej białka HPK1. W tym celu planowane jest przeprowadzenie badania klinicznego fazy I i wyznaczenie dawki rekomendowanej do dalszego rozwoju klinicznego.
Dodatkowym efektem prac badawczych będzie uruchomienie oraz wdrożenie wydajnej platformy służącej identyfikacji modulatorów aktywności limfocytów T, nie tylko antagonistów HPK1.

Cele projektu:

Celem projektu jest rozwój małocząsteczkowych immunomodulatorów ludzkiego układu odpornościowego w postaci inibitorów kinazy HPK1, wykazujących biodostępność po podaniu doustnym o aktywności przeciwnowotworowej.

Harmonogram realizacji działalności naukowej:

Rok akademicki: 
Semestr: I-II
Opis realizowanych badań:

Rok akademicki:
Semestr: III-IV
Opis realizowanych badań:

Rok akademicki: 
Semestr: V-VI
Opis realizowanych badań:

Rok akademicki:
Semestr:
Opis realizowanych badań: